La couleuvrine est un canon à tube long et fin de la fin du Moyen-Age et du début de la Renaissance. Appartenant aux « Six Calibres de France » définis sous le roi François 1er (1494-1547) dans un souci de standardisation de l'artillerie, la grande couleuvrine mesure 2,60 mètres et pèse 1 495 kilos. Fondue à Marseille, on retrouve les initiales du fondeur, Claude Laignel, gravées autour de la lumière, l’orifice permettant la mise à feu.

Sur la culasse du canon, la salamandre, emblème de du roi François Ier, accompagné des fleurs de lys sur sa volée. Ultérieurement, l’écu de Louise de Savoie est ajouté en référence à la régence de sa mère ainsi que l’année 1525, date de l’achat du navire. Rare exemplaire encore conservé, ce canon se trouvait à bord de la nef royale, la Sainte-Marie-Bonaventure dite la « Grande Maitresse ».

Le 26 septembre 1533, une tempête se lève, alors que la nef royale est amarrée dans le port de Toulon. La pluie tombe à torrent et la foudre s’abat sur le navire provoquant vraisemblablement une explosion due aux réserves de poudres. Si l’endroit exact où se trouve l’épave de la nef demeure inconnu, cette couleuvrine a été retrouvée dans la rade de Toulon le 10 mai 1951 lors d’une opération de dragage pour la construction des fondations du futur quai Est du port de commerce.